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BHK-21倉鼠腎細胞
貨號:BY-0693
品牌:其它品牌
規(guī)格:T25瓶
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BHK-21(Baby Hamster Kidney-21)倉鼠腎細胞是生物學和醫(yī)學研究中常用的貼壁型細胞系,因其易于培養(yǎng)、增殖能力強及廣泛的適用性,在病毒學、疫苗生產(chǎn)、基因工程等領域發(fā)揮著重要作用。以下從細胞來源、特性、培養(yǎng)方法及應用場景等方面展開詳細介紹:
一、細胞來源與歷史背景
BHK-21 細胞系源自 1961 年,由 Macpherson 和 Stoker 從新生敘利亞倉鼠的腎臟組織中分離建立,*初為成纖維細胞樣細胞。該細胞系在傳代過程中經(jīng)歷了多次克隆化篩選,其中*常用的亞克隆是
BHK-21 C13
(第 13 次克?。?,具有穩(wěn)定的二倍體核型(2n=44),但在長期傳代后可能逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)楫惐扼w。因其生長特性優(yōu)良,BHK-21 成為全球?qū)嶒炇覐V泛使用的標準細胞系之一。
二、生物學特性
形態(tài)與生長特性
BHK-21 細胞貼壁生長時呈梭形或成纖維細胞樣,細胞輪廓清晰,貼壁能力強,可在培養(yǎng)瓶表面形成均勻單層。在對數(shù)生長期,細胞倍增時間約為 12–24 小時,增殖速度快,適合大規(guī)模培養(yǎng)。
分子與功能特征
病毒易感性
:對多種病毒(如痘苗病毒、單純皰疹病毒、副流感病毒等)高度敏感,是研究病毒復制機制和制備病毒疫苗的理想模型。
轉(zhuǎn)染效率高
:易于通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、電穿孔等方法導入外源基因,常用于重組蛋白表達和基因功能研究。
**性
:作為非腫瘤源性細胞系,BHK-21 在疫苗生產(chǎn)中具有較低的致瘤性風險,符合生物制品**性要求。
三、培養(yǎng)方法與條件
培養(yǎng)基與營養(yǎng)需求
常用培養(yǎng)基為
MEM(Minimum Essential Medium)
或
DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)
,需添加 10%–15% 胎牛血清(FBS)提供生長因子,同時補充 1% 雙抗(青霉素 / 鏈霉素)防止污染。pH 值需維持在 7.2–7.4,滲透壓控制在 280–320 mOsm/kg。
培養(yǎng)環(huán)境
細胞需在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),濕度保持在 95% 以上。當細胞融合度達到 80%–90% 時,需進行傳代:用 0.25% 胰酶 - EDTA 消化液處理,輕柔吹打后按 1:3–1:5 比例接種至新培養(yǎng)瓶。
凍存與復蘇
凍存液采用 “90% FBS+10% DMSO”,細胞密度調(diào)整為 1×10?–5×10? cells/mL,經(jīng)程序降溫(-80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮)長期保存。復蘇時需快速解凍(37℃水浴),離心去除凍存液后更換新鮮培養(yǎng)基,以減少 DMSO 對細胞的毒性。
四、應用領域
病毒學研究與疫苗生產(chǎn)
病毒增殖
:BHK-21 是生產(chǎn)獸用疫苗(如口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗)的核心細胞系,因其高效支持病毒復制且易于大規(guī)模培養(yǎng)。
病毒載體構(gòu)建
:用于制備腺病毒、慢病毒等基因治療載體,或研究病毒與宿主細胞的相互作用機制。
重組蛋白表達
通過基因工程改造,BHK-21 可高效表達外源蛋白(如細胞因子、受體蛋白),尤其適用于需要翻譯后修飾的復雜蛋白生產(chǎn),部分重組蛋白已應用于生物制藥領域。
藥物毒性與細胞生物學研究
作為體外模型評估藥物對哺乳動物細胞的毒性作用,檢測細胞形態(tài)、增殖率或凋亡指標。
用于研究細胞信號通路、細胞黏附機制及細胞周期調(diào)控等基礎生物學問題。
生物制品質(zhì)量控制
在疫苗和重組蛋白生產(chǎn)中,BHK-21 可用于病毒滴度測定、外源因子檢測等質(zhì)量控制環(huán)節(jié),確保產(chǎn)品**性與有效性。
五、注意事項
細胞污染監(jiān)測
:定期檢查細胞形態(tài)及培養(yǎng)基狀態(tài),避免細菌、真菌或支原體污染(可通過 PCR 或熒光染色檢測)。
傳代次數(shù)控制
:長期傳代可能導致細胞特性改變(如核型異常),建議使用低代次細胞(<20 代)進行關鍵實驗。
**性操作
:涉及病毒培養(yǎng)時,需在生物**柜中操作,并遵循相應等級的實驗室**規(guī)范。
總結(jié)
BHK-21 倉鼠腎細胞憑借其易培養(yǎng)、高增殖活性和多功能性,成為生命科學領域的 “萬能細胞工具”。從疫苗工業(yè)化生產(chǎn)到前沿基因治療研究,其應用覆蓋了生物醫(yī)學的多個維度,未來在細胞治療與再生醫(yī)學中仍將發(fā)揮不可替代的作用。
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